【输血技术】
1.随时可用的冻存血小板检测 HIT 和 VITT 抗体
背景：肝素诱导的血小板减少症 （Heparin-induced thrombocytopenia, HIT）的实际发生率被认为远高于被确诊的频率。操作简单的血小板因子-4（Platelet Factor-4, PF4）-聚阴离子酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assays, ELISAs）、敏感性高但特异性不高。而可准确检测血小板功能的实验室方法，比如：5-羟色胺释放试验、肝素诱导的血小板活化试验和 PF4 依赖性 P-选择素表达试验等都需要新鲜血小板，并且设计复杂，只能在特殊的参比实验室开展。
目的：为了能够扩大功能性实验的检测方法，我们通过改进血小板保存条件来显著改善血小板活力；并且开发了一种简单的检测血小板的功能试验，主要是通过ELISA 实验检测血小板α颗粒蛋白和血小板反应蛋白-1（Thrombospondin-1, TSP1） 的释放。
方法：通过程控降温冻存血小板，可以改善血小板冻存后的活性。冻存数月的血小板经过PF4 或肝素处理，后续通过TSP1释放试验 （TSP1 release assay, TRA） 评估它们被HIT 和疫苗诱导的免疫性血栓性血小板减少症 （vaccine-induced immune thrombotic thrombocytopenia, VITT） 抗体激活的能力。
结果与结论：与无血小板激活抗体的疑似 HIT 患者血样相比，HIT和自发性 HIT 患者血样使用 PF4 （PF4-TRA） 和肝素处理的冻存血小板（heparin-TRA）的TSP1释放量显著升高。疑似HIT患者包括部分在 PF4-聚阴离子 ELISA 检测结果为强阳性但无血小板激活的患者。在TRA检测中发现，4例 VITT 患者的样本可激活仅经PF4处理的冻存血小板，但不能激活经肝素处理的冻存血小板，这个检测结果与最新研究数据相一致，提示仅经过PF4 处理的血小板更适合进行VITT的血小板功能性检测。这些发现有可能改变 HIT 和 VITT 的检测模式，这种易推广、技术简单的功能性测试可用于快速和准确的院内诊断。
关键词：肝素诱导的血小板减少症；血小板因子-4；血小板反应蛋白-1；冻存血小板
原文献：Kanack AJ, Jones C, Singh B, et al. Off-the-shelf cryopreserved platelets for the detection of HIT and VITT antibodies [J]. Blood. 2022;blood.2022017283.
杨 盼 顾海慧 投稿
2022年10月10日
2.在非人灵长类动物（NHP）模型中评估MHC纯合子iPSC来源的 CD34+造血祖细胞的安全性和免疫原性
已有研究探索了体外扩增的体细胞髓系祖细胞的给药可促进更快的髓系恢复及提高清髓后总体存活率。诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell, iPSC） 技术的最新进展是成品免疫相容性髓系祖细胞（包括来源于主要组织相容性复合体[major histocompatibility complex, MHC]纯合超供体的细胞产品）来源的替代途径，增加了MHC匹配细胞的可用性，最大化干细胞库的效用。
然而，iPSC来源祖细胞潜在的致畸和致瘤潜风险以及它们在移植后是否会诱导同种异体反应性抗体仍不清楚。通过毛里求斯食蟹猴 （Mauritian cynomolgus macaque, MCM） 非人灵长类动物 （nonhuman primate, NHP） 模型，我们评估了使用源自MHC纯合子iPSCs（MHC homozygous iPSCs, iHPs）的 CD34+CD45+造血祖细胞治疗清髓性造血干细胞 （hematopoietic stem cell, HSC） 移植后血细胞减少症的安全性和有效性。
我们证明了iHPs 的输注具有良好的耐受性和安全性，在HSC移植和iHP输注后长达1年的观察发现毛里求斯食蟹猴中没有产生畸胎瘤或肿瘤。重要的是，即使在用γ干扰素增加iHPs的 MHC表达后，iHPs也不会在 MHC 匹配或不匹配的免疫活性MCMs中诱导显著水平的同种抗体。这些结果支持iHP产品运用于清髓治疗的可行性，并表明iHP产品诱导产生同种异体反应性抗体的风险较低。
要点：
①NHP输注iHPs是安全且耐受性良好；
②iHPs是低免疫原性的，并且可以以低的同种免疫风险给药。
关键词：非人灵长类动物；MHC；iPSCs；iHPs
原文 献：Zhao HQ, Serrano K, Culibrk B, et al. Cold-stored platelets are effective in an in vitro model of massive transfusion protocol assessed by rotational thromboelastometry[J]. Transfusion, 2022, 62 Suppl 1: S53-S62.
韦晓强 黄韦华 投稿
2022年10月10日
3.院前输血工作中航空救援重复携带的红细胞质量没有下降
背景：输注红细胞是严重出血或创伤后不可或缺的治疗方法。紧急情况下，院前输血提供了及时保障。在多国已经开展的情况下，德国目前建立了在救护飞机里进行院前输血保障。有关红细胞运输物流是否符合法规以及航空重复携带情况下红细胞质量的信息鲜有报道。本研究目的是通过分析生化参数和红细胞形态（i）验证运输物流符合法规；（ii）评估产品质量。
研究设计和方法：根据法规要求，在整个红细胞保存期内采用了1d运输、1d隔离观察储存和1d常规储存的轮换系统。在空中救援任务中运输的红细胞（飞行组）与对照组进行比较，除直升机运输外，其他处理方式相同。对红细胞进行目视检查，并在轮换系统中设置了温度监测记录。对保存期结束时的红细胞（终点样本）进行血红蛋白、红细胞压积、游离血红蛋白、溶血、平均红细胞体积、钾和pH值等检测。同时使用流式形态测量法评估形态学的变化。
结果：本研究观察了飞行组81单位红细胞、对照组50红细胞。在飞行组，30单位红细胞被输注使用。红细胞平均被重复携带11次（7～13次）。平均飞行时间为18.3h（6.6～28.8h）。轮换系统确保了对法规指南的遵守，特别是遵守了2～6℃的储存条件。在空中救援任务中，重复携带的红细胞生物化学和形态质量参数没有表现出任何变化。也没有观察到与飞行时间有关的相关性
讨论：空中救援任务重复携带后红细胞质量在生物化学和形态学参数方面与对照样品没发生下降性改变。在长达42d的储存过程中，产品质量符合德国规定。物流和温度条件的维持是安全和可行的。因此，红细胞的轮换系统是达到法规要求的，为空中救援任务提供红细胞，使院前输血能够在严重事件现场挽救生命。
关键词：院前输血；红细胞形态学航空救援；红细胞保存； 流式形态测量法；急救输血
原文献：Boecker C, Sitzmann N, Halblaub Miranda JL, et al. Noninferior Red Cell Concentrate Quality after Repeated Air Rescue Mission Transport for Prehospital Transfusion[J]. Transfus Med Hemother. 2022;49(3):172-179.
赵子悦 臧艳投稿
2022年9月29日
4．γ射线和X射线照射不会影响含有添加剂溶液（PAS-E）单采血小板的冷藏质量
背景：与室温下储存的血小板相比，血小板冷藏（冷藏）具有延长保质期的优点，并降低了细菌生长的风险。然而，经过一些特别处理，例如辐照，可以进一步提高冷藏血小板的安全性和/或改变其质量。对血小板成分进行辐射，可以预防高危患者输血相关移植物抗宿主病（TA-GvHD）；虽然辐照对室温储存的血小板组分的质量几乎没有影响，但没有数据评估辐照对冷藏后的影响。
研究方法：使用Trima单采平台采集三剂量单采血小板到40%血浆/60% PAS-E中，并在采集后8h内冷藏（2～6°C）。d2，三个剂量分别进行γ或X射线照射或保持未照射三种处理。在21d内检测这三种处理组的血小板。
结果：在储存的21d内，所有组的血小板浓度都下降了约20%（P＞0.05）。辐照（γ或X射线）不会影响血小板代谢，21d内pH值保持在最低值（＞6.4）以上。无论辐射源如何，未辐照和辐照血小板的表型和上清液组成相似。辐射不会影响功能反应（聚集和凝块形成）。
讨论：伽马射线和X射线照射不会影响在冷藏环境中储存长达21d的血小板成分的质量，这说明了辐照冷藏血小板的可行性，同时，辐照冷藏血小板也可提高风险患者的安全性。
关键词：X射线；γ射线；血小板添加剂溶液；血小板浓缩物；冷藏
原文献：Johnson L, Roan C, Costa M, Aung H H, Marks D C. Gamma and X-ray irradiation do not affect the in vitro quality of refrigerated apheresis platelets in platelet additive solution (PAS-E). Transfusion. 2022,62 (Suppl 1): S43–S52.
张智慧投稿
2023年3月10日
