【血液疗法】

1.甲状腺功能亢进术前血浆置换治疗

目的：治疗性血浆置换 (TPE) 是一种抗甲状腺药物 (ATD) 禁忌或无反应的情况下降低甲状腺激素水平的治疗方法。

方法：我们分析了 2008年1月至 2016年12月在我中心接受术前TPE的11例甲亢患者。

结果：总共对11名甲亢患者进行了41例TPE。患者中位年龄为40岁，90.9%的患者为女性。7名患者患有Graves'病(GD)，四名患者患有毒性多结节性甲状腺肿(TMNG)。TPE适应症的分布包括ATD禁忌症 (64%) 和对ATD反应不足 (36%)。 两名患者TPE后没有获得足够的反应，因此应用了胆碱酯酶加甲巯咪唑和Lugol溶液。TPE疗程中位数为3。在TPE期间，除一名患者有用药禁忌外，其他患者均同时使用了β受体阻滞剂。应用 TPE 后，FT3 和 FT4 激素的减少和 TSH 水平的增加具有统计学意义（P 值分别为 0.003、0.033 和 0.008）。此外，TPE 应用前后血小板计数和碱性磷酸酶 (ALP) 水平的下降情况也不同，差异具有统计学意义（P 值分别为 0.05 和 0.005）。 TPE后，Na和Cl电解质以及白蛋白水平也有所改善，差异具有统计学意义（P 值分别为 0.018、0.015 和 0.018）。关于 TPE 应用的不良事件，1名患者出现过敏反应，1名患者中凝血酶原时间延长而无任何临床表现。10名患者接受了甲状腺全切除术，1名患者接受了因妇科恶性肿瘤在全腹式子宫切除术和双侧输卵管卵巢切除术 (TAHBSO) 手术，没有出现任何严重并发症。

结论：美国血浆置换学会(ASFA)指南是最具参考价值的指南，它提到在甲状腺手术前使用 TPE，但仅适用于甲状腺毒症患者。但TPE应用的合理性取决于报告的研究和其他甲状腺功能亢进症原因的病例经验，特别是在ATDs 禁忌或无效以及需要用于紧急手术的情况下。根据我们的研究结果，TPE在任何手术前对甲亢患者的应用都是可靠而有效的。

补充介绍：根据ASFA指南，TPE在少数甲状腺疾病中的推荐级别为 II 类（二线治疗选择）和 2C 级（弱推荐），例如甲状腺危象和与自身免疫性甲状腺炎相关的类固醇反应性脑病（桥本甲状腺炎）脑病。甲状腺疾病中TPE的目的是降低甲状腺激素水平和抗体、结合蛋白、细胞因子和儿茶酚胺。

关键词：双侧输卵管卵巢切除术；甲状腺功能亢进症；治疗性血浆置换；甲状腺切除术；经腹全子宫切除术

原文献：Kirkizlar HO, Celik M. Therapeutic plasma exchange in hyperthyroidism prior to surgery[J]. J Endocrinol Invest. 2023,46(1):173-179.

程宁 钱宝华 投稿

2023年3月10日

2.小鼠模型卵巢内单次注射干细胞和血小板的分泌因子，可缓解年龄相关的卵巢不孕症

背景：系统注射骨髓干细胞和活化富血小板血浆（SC-PRP）的可溶性因子可通过旁分泌途径改善化疗引起卵巢损伤小鼠和卵巢不孕患者的卵巢功能。然而，对于年龄相关的卵巢不孕症和局部注射给药的作用还未有有效的评估。

目的：本研究旨在评估在卵巢内单次注射SC-PRP是否能恢复老年小鼠的卵巢功能、卵母细胞质量和发育能力。

研究设计：小鼠模型中再现女性生殖的3个生理阶段，即年轻、高龄生产和更年期（每组12只动物），卵巢刺激后评估SC-PRP对年龄相关的卵巢不孕症的影响。雌性小鼠随机接受卵巢单次注射（10µL/卵巢）生理盐水、富血小板血浆，或SC-PRP。注射7d后，小鼠接受卵巢刺激、自然交配，处死并收集卵巢和输卵管，进行组织学检测和分子分析，评估卵母细胞成熟度和早期胚胎发育。

结果：卵巢内单次注射SC-PRP，能促进年轻、高龄生产和老年小鼠的卵泡活化和发育。SC-PRP通过提高成熟卵母细胞的数量和质量改善老年小鼠的生育能力，并促进所有研究年龄小鼠胚胎发育至囊胚阶段。这些生育能力的结果与线粒体的质量、治疗增加线粒体的DNA拷贝数以及减少氧化损伤和细胞凋亡呈正相关。组织学检测结果与蛋白组学结果相一致。蛋白组学功能分析提示分子机制与卵母细胞的成熟和质量、线粒体功能和卵巢基质恢复有关。

结论：骨髓来源的干细胞和活化富血小板血浆是一种非常有前景的能改善与年龄相关的卵巢不孕的治疗方法，疗效优于单独使用富血小板血浆。尽管需要在人体卵巢中进一步试验研究，但是通过无创动员后收集的干细胞因子的自体来源特性，联合富血小板血浆，以及局部给药的方法，均提示干细胞和活化富血小板血浆的未来临床应用是安全和有效的。

原实验设计流程图

关键词：年龄相关的不孕；早期胚胎发育；生育恢复，卵巢内给药；线粒体功能；卵母细胞；卵巢衰老；血小板活化；富血小板血浆；干细胞分泌因子

原文献：MARCHANTE M, BUIGUES A, RAMIREZ-MARTIN N, et al. Single intraovarian dose of stem cell and platelet-secreted factors mitigates age-related ovarian infertility in a murine model[J]. Am J Obstet Gynecol, 2023.

杨玥  顾海慧 投稿

                                                     2023年03月10日

3.病毒特异性T细胞库可实现细胞治疗现货供应的需求

   输注来源于造血干细胞移植(Hematopoietic Stem Cell Transplant, HSCT)供体的病毒特异性T细胞(Virus-specific T Cells, VSTs)治疗病毒相关疾病及恶性肿瘤在HSCT患者中已被证实是安全有效的。自体VSTs在治疗非HSCT患者病毒相关的恶性肿瘤中也被证实有效。两种情况的VSTs都是患者特异性的，采集、制备及临床应用相关的检验耗费的时间限制了其在急性患者中的应用。而且，符合GMP规范的细胞制品价格十分昂贵，未感染病毒的HSCT供体和因肿瘤免疫抑制导致T细胞无能的患者VSTs制备也经常失败。因此，建立一个高度特异性的可用于多个非特定患者的VSTs库(Banked VSTs, B-VSTs)很有必要。B-VSTs面临的最大挑战是高度多态性和免疫原性的人类白细胞抗原(Human Leukocyte Antigens, HLA)在B-VSTs与受体之间不能完全匹配。由于这些抗原将经过加工的抗原提呈给T细胞受体，这要求B-VSTs与受体之间至少部分HLA相合。HLA不相合将导致输注的异体T细胞被快速清除和输注的同种活性T淋巴细胞诱导移植物抗宿主病。本文中，我们介绍了目前用于治疗病毒感染或恶性肿瘤的B-VSTs临床试验的结果，并评估了其作为靶向非病毒相关恶性肿瘤的嵌合抗原受体平台的潜力。我们将重点介绍VSTs治疗现货供应的特性，以及其大规模临床应用必须克服的困难。

图注：B-VSTs可解冻后立即用于多个患者；相比之下来源于HCST供体VSTs的制备及质控时间高达4周甚至更久，且只能用于单个患者。

图1.B-VSTs与患者特异性VSTs的快速可用性和成本效益比较

表1.异基因B-VSTs治疗机会性病毒性疾病的临床研究

关键词：病毒特异性T细胞(Virus-specific T Cells, VSTs)；细胞治疗

原文献：Quach DH, Lulla P, Rooney CM. Banking on virus-specific T cells to fulfill the need for off-the-shelf cell therapies[J]. Blood. 2023，141(8):877-885.

周载鑫 顾海慧 投稿

2023年03月10日

4.自体T细胞治疗HLA-A^*02患者MAGE-A4实体肿瘤的研究：一项Ⅰ期临床试验

   经过亲和力优化的T细胞受体可以增强过继T细胞治疗的潜力。Afamitresgene autoeucel （Afami-cel，曾用名ADP-A2M4）疗法是一种靶向黑色素瘤相关抗原A4 （Melanoma-associated Antigen A4, MAGE-A4）的人类白细胞抗原限制性自体T细胞疗法。MAGE-A4是一种癌症/睾丸抗原（Cancer-testis Antigen, CTA），在多种实体瘤中均有不同水平的表达。

   对此，我们进行了一项多中心、剂量递增的Ⅰ期临床试验（试验编号NCT03132922），试验主要招募MAGE-A4阳性的复发/难治性转移性实体瘤患者，包括滑膜肉瘤（Synovial Sarcoma，SS）患者、卵巢癌患者和头颈癌患者（这些患者同时为HLA-A^*02阳性）。本试验的主要观测指标是临床安全性，次要疗效指标包括总体疗效评价（Overall Response Rate, ORR）和疗效持续时间。主要观测指标安全性研究发现，所有患者（38例，9种肿瘤类型）均表现出血液学药物毒性效果（≥3级）；55%的患者出现细胞因子释放综合征（90%≤2级）。次要终点疗效研究发现，全体患者的总体缓解率为24%（9/38），其中SS患者的总体缓解率为44%（7/16），所有其他癌症患者的总体缓解率9%（2/22）。全体患者和SS患者的中位疗效持续时间分别为25.6周（95%置信区间为（12.286周，未达到终点））和28.1周（95%置信区间为（12.286周，未达到终点））。探索性分析表明，Afami-cel能获得较高水平的实体肿瘤内部免疫细胞浸润，可以通过干扰素-γ驱动机制来发挥效应，并能引发适应性免疫反应。此外，Afami-cel的风险收益比尚可接受，特别是在转移性SS患者中具有早期和持久性的反应。尽管本试验规模较小，导致结论的可靠性下降，但就目前结果而言值得在更大规模的研究中进一步测试。

图1 研究设计

图4 Afami-cel治疗滑膜肉瘤胸部转移灶效果

关键词：肿瘤免疫治疗；头颈癌；肉瘤；卵巢癌；T细胞

原文献：Hong DS, Van Tine BA, et al. Autologous T cell therapy for MAGE-A4 solid cancers in HLA-A*02 patients: a phase 1 trial[J]. Nat Med. 2023 Jan;29(1):104-114.

周载鑫 顾海慧  投稿

2023年05月10日

5.单细胞分辨率绘制小鼠骨髓巨核细胞空间转录组基因表达图谱

要点：骨髓中产生血小板的细胞由不同的群体组成；新技术可以在单细胞水平上揭示完整组织的基因表达变化；基因表达从单个细胞中定量，其中一些变化与细胞位置有关；这项技术的改进将有助于绘制骨髓中血小板生成细胞的图谱变化。

背景: 虽然巨核细胞是众所周知的血小板生成细胞，但最近的单细胞RNA测序数据显示，部分巨核细胞亚群具有预测免疫调节和骨髓龛支持的作用。虽然这些研究揭示了巨核细胞转录变异的有趣信息，但这些亚群的产生、定殖和调控尚未阐明。考虑到骨髓组织的复杂性，我们推断空间转录组学方法的应用可以帮助在时空背景下剖析巨核细胞的异质性。

目的：利用空间解析的转录组学方法，在单细胞水平上原位获得小鼠骨髓巨核细胞的异质性。

方法：取C57BL/6J小鼠股骨骨髓切片,利用Nanostring GeoMx数字空间分析平台和小鼠全转录组阵列，我们在整个骨髓中原位分析了44个单个巨核细胞(通过CD41+免疫荧光标记)，包括邻近和非邻近内皮细胞(直接与VE-cadherin阳性细胞接触)。

结果和讨论：主成分分析显示转录组谱与血管邻近性之间没有关联。然而，骨的近端和远端区域对巨核细胞转录组表达谱有显著影响。有两个（H2bc11、Gm10058）和三个基因（Tms4bx、Pf4、Ppbp）分别在股骨近端和远端巨核细胞中过表达（图H）。值得注意的是，促血小板碱性蛋白和血小板因子4这两个与血小板生成相关的基因在近端巨核细胞中表达更高。这些研究表明空间位置可能影响巨核细胞异质性，同时进一步证实了研究巨核细胞亚群在其空间取向复杂性具有重要意义。

                                                                                          图   H

关键词：空间转录组学；巨核细胞；异质性；血小板

原文献：Julia Tilburg, Andrew Stone, James Billingsley, et al. Spatial transcriptomics of murine bone marrow megakaryocytes at single cell resolution[J]. Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis,2023.

李艺松 黄韦华  投稿

2023年05月10日